a国产在线v的不卡视频 I 特级片在线观看 I 5566成人网 I 大番蕉尹人一线久久 I 网站久久 I 天天搞夜夜爽 I 国产黄色一区 I 日日躁夜躁aaaaxxxx I 日本亚洲中文字幕不卡 I 777欧美 I 天堂成人国产精品一区 I 国产1卡2卡三卡四卡精品 I 黄色一区二区三区 I 操碰97 I 日韩性网 I 91精品国产综合久久香蕉922 I 中文不卡视频在线 I 37pao成人国产永久免费视频 I 久久夜夜爽 I 五月天中文字幕一区二区 I 国产高清av久久久久久久 I 国产亚洲三区 I 成人免费精品 I 亚洲另类伦春色综合 I 国产av在线www污污污十八禁 I 国产在线欧美日韩 I 永久免费毛片在线观看 I 男女免费观看做爰视频在线观看 I 国产精品yy9299在线观看 I 欧美精品一区二区久久婷婷 I 午夜av电影在线观看 I 9999久久久久 I 极品美女呻吟在线 I 2019中文字幕在线免费观看 I 丝袜av午夜色

1 原  理 
    本試驗采用瓊脂稀釋法將不同濃度的抑菌劑混合溶解在瓊脂培養(yǎng)基中，然后點種細(xì)菌，通過細(xì)菌的生長與否，確定抗（抑）菌物質(zhì)抑制受試菌生長的zui低濃度，即zui小抑菌濃度（Minimal  Inhibitory  Concentration，MIC）。本方法適用于非溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抗（抑）菌效果的鑒定。  

2 實驗材料及器材 

（1）實驗菌株  金黃色葡萄球菌 ATCC 6538 ，大腸桿菌 8099或ATCC 11229，可根據(jù)抑菌劑的用途，選擇特定的菌株  
（2）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，制備后經(jīng)高壓滅后，置 45℃～50℃水浴備用，此培養(yǎng)基將用于對照試驗  
（3）磷酸鹽緩沖液  0.03mol/L，pH7.2

（4）滅菌蒸餾水 
（5）加樣器（1μL～10μL）

（6）45℃～50℃水浴恒恒溫培養(yǎng)箱

（7）吸管、試管、平皿

（8）37℃恒溫培養(yǎng)箱

3  操作步驟 

（1）抗（抑）菌溶液的配制：以無菌操作取 5mL或 5g（固體研磨后）樣品，放入 45mL 滅菌蒸餾水中，充分振蕩溶解，配成 10% 的均勻分散的溶液或懸液。 

（2）抗菌劑稀釋液配制：將已配成 10% 的抗（抑）菌溶液或懸液用蒸餾水做對倍系列稀釋成不同濃度的受試液，置 45℃～50℃ 水浴恒溫備用。  

（3）雙倍濃度營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：制備后經(jīng)高壓滅菌后，置 45℃～50℃ 水浴備用，此培養(yǎng)基將用于稀釋抗（抑）菌溶液或懸液。 

（4）含抗（抑）菌液培養(yǎng)基的配制：分別取 10mL 系列稀釋的抗菌液加入平皿內(nèi)。將在 45℃～50℃ 水浴中的雙倍濃度營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 10mL，加進(jìn)平皿內(nèi)，邊加邊搖晃平板，使抗（抑）菌液和培養(yǎng)基充分混勻。  

（5）用加樣器取1μL～2μL（含菌量約為 107
cfu/mL 的PBS溶液）菌懸液點種于含抗（抑）菌液培養(yǎng)基的平皿，接種后所形成的菌液圈直徑約 5mm～8mm（每個點菌量約為 104cfu）。 

（6）以同樣方法接種不含抗（抑）菌成分的營養(yǎng)瓊脂平板，作為陽性對照。

（7）將接種后的平板放置 35℃ 恒溫培養(yǎng)箱中，倒置培養(yǎng) 18h～24h，觀察結(jié)果。

4 評價規(guī)定 

菌落生長被*抑制的zui低抗（抑）菌液濃度為該樣品對受試菌的MIC。單一菌落生長可忽略不計。

5 注意事項 

（1）接種時，應(yīng)由低抗（抑）菌劑濃度向高濃度平板依次接種，zui后接種對照平板。

（2）為了保證平板受熱均勻，培養(yǎng)時平板堆放不得超過4個。